ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (อังกฤษ: polymerase chain reaction; ตัวย่อ: PCR) เป็นกระบวนการสังเคราะห์ชิ้นส่วนดีเอ็นเอในหลอดทดลอง ซึ่งกระบวนการนี้เลียนแบบกระบวนการสังเคราะห์ดีเอ็นเอในสิ่งมีชีวิต ผู้คิดค้นเทคนิคพีซีอาร์ คือ Kary Mullis พีซีอาร์ประกอบไปด้วยขั้นตอนต่าง ๆ ดังต่อไปนี้
- การแยกสายดีเอ็นเอเกลียวคู่ออกจากกัน (Denaturation) ใช้อุณหภูมิ ประมาณ 94 องศาเซลเซียส เมื่อเริ่มต้นดีเอ็นเอแม่แบบ จะอยู่ในลักษณะที่เป็นเกลียวคู่ เมื่อเพิ่มอุณหภูมิถึงประมาณ 94 องศาเซลเซียส จะทำให้พันธะไฮโดรเจนระหว่างคู่เบสของดีเอ็นเอถูกทำลาย ทำให้เส้นดีเอ็นเอแยกออกจากกัน โดยขั้นตอนนี้จะแตกต่างจากการสังเคราะห์ดีเอ็นเอในธรรมชาติ คือ ในสิ่งมีชีวิติจะมีเอนไซม์เฮลิเคส (Helicase) ช่วยในการแยกสายและคลายเกลียวดีเอ็นเอ
- การจับของไพร์เมอร์กับดีเอ็นเอแม่แบบ (Annealing) ใช้อุณหภูมิประมาณ 40-62 องศาเซลเซียส เมื่อแยกสายดีเอ็นเอออกจากกันแล้ว จะลดอุณหภูมิลงเหลือ 40-62 องศาเซลเซียส เพื่อให้ดีเอ็นเอสังเคราะห์ขนาดสั้นประมาณ 15-25 เบส ที่เรียกว่า ไพร์เมอร์ (Primer) เข้ามาจับบริเวณที่มีลำดับเบสคู่สมกัน ในการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ไม่สามารถที่จะเริ่มจากศูนย์ได้เนื่องจากเอ็นไซม์ดีเอ็นเอพอลิเมอร์เรส (DNA polymerase) ต้องการปลาย-OH ทางด้าน 3'เพื่อนำ นิวคลีโอไทด์ตัวต่อมาต่อ ซึ่งในสิ่งมีชีวิตจะมีเอ็นไซม์ที่มีชื่อว่า ไพรเมส (Primase) เป็นตัวสร้างอาร์เอ็นเอไพรเมอร์ขึ้น
- การสังเคราะห์ดีเอ็นเอสายใหม่ต่อจากไพรเมอร์ (Extension) ใช้อุณหภูมิ ประมาณ 68-72 องศาเซลเซียส ในขั้นตอนนี้จะเป็นการสร้างสายดีเอ็นเอต่อจากไพร์เมอร์ โดยอุณหภูมิที่ใช้จะพอเหมาะกับ การทำงานของ Taq DNA polymerase
องค์ประกอบ องค์ประกอบที่สำคัญในการทำ PCR ได้แก่
- ดีเอ็นเอแม่แบบ (Template DNA)
- ไพรเมอร์ Primer
- เอ็นไซม์DNA Polymerase ชนิดทนความร้อน (Taq DNA polymerase)
- Deoxy nucleotide triphosphate(dNTP)
- บัฟเฟอร์สำหรับเอ็นไซม์ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (PCR Buffer)
- แมกนีเซียมคลอไรด์(MgCl2)
- เครื่องมือที่สำคัญในการทำพีซีอาร์ได้แก่ Thermal cycler หรือ PCR machine
แหล่งข้อมูลอื่น - PCR at Home - Amateur Scientist article in the July 2000 issue of Scientific American on performing PCRs with low-cost household materials.
- US Patent for PCR
- Narrated animation and step-through animation of PCR - From the educational multimedia company Sumanas. Adobe Flash required.
- Step-through animation of PCR - From Cold Spring Harbor's Dolan DNA Learning Center. Adobe Flash required.
ปฏ, ยาล, กโซ, พอล, เมอเรส, งกฤษ, polymerase, chain, reaction, วย, เป, นกระบวนการส, งเคราะห, นส, วนด, เอ, นเอในหลอดทดลอง, งกระบวนการน, เล, ยนแบบกระบวนการส, งเคราะห, เอ, นเอในส, งม, ดค, นเทคน, คพ, อาร, kary, mullis, อาร, ประกอบไปด, วยข, นตอนต, าง, งต, อไปน, การแ. ptikiriyalukosphxliemxers xngkvs polymerase chain reaction twyx PCR epnkrabwnkarsngekhraahchinswndiexnexinhlxdthdlxng sungkrabwnkarnieliynaebbkrabwnkarsngekhraahdiexnexinsingmichiwit phukhidkhnethkhnikhphisixar khux Kary Mullis phisixarprakxbipdwykhntxntang dngtxipnikaraeyksaydiexnexekliywkhuxxkcakkn Denaturation ichxunhphumi praman 94 xngsaeslesiys emuxerimtndiexnexaemaebb caxyuinlksnathiepnekliywkhu emuxephimxunhphumithungpraman 94 xngsaeslesiys cathaihphnthaihodrecnrahwangkhuebskhxngdiexnexthukthalay thaihesndiexnexaeykxxkcakkn odykhntxnnicaaetktangcakkarsngekhraahdiexnexinthrrmchati khux insingmichiwiticamiexnismehliekhs Helicase chwyinkaraeyksayaelakhlayekliywdiexnex karcbkhxngiphremxrkbdiexnexaemaebb Annealing ichxunhphumipraman 40 62 xngsaeslesiys emuxaeyksaydiexnexxxkcakknaelw caldxunhphumilngehlux 40 62 xngsaeslesiys ephuxihdiexnexsngekhraahkhnadsnpraman 15 25 ebs thieriykwa iphremxr Primer ekhamacbbriewnthimiladbebskhusmkn inkarsngekhraahdiexnex imsamarththicaerimcaksunyidenuxngcakexnismdiexnexphxliemxrers DNA polymerase txngkarplay OH thangdan 3 ephuxna niwkhlioxithdtwtxmatx sunginsingmichiwitcamiexnismthimichuxwa iphrems Primase epntwsrangxarexnexiphremxrkhun karsngekhraahdiexnexsayihmtxcakiphremxr Extension ichxunhphumi praman 68 72 xngsaeslesiys inkhntxnnicaepnkarsrangsaydiexnextxcakiphremxr odyxunhphumithiichcaphxehmaakb karthangankhxng Taq DNA polymerasekhntxnkartha PCRxngkhprakxb aekikhxngkhprakxbthisakhyinkartha PCR idaek diexnexaemaebb Template DNA iphremxr Primer exnismDNA Polymerase chnidthnkhwamrxn Taq DNA polymerase Deoxy nucleotide triphosphate dNTP bfefxrsahrbexnismdiexnexphxliemxers PCR Buffer aemkniesiymkhlxird MgCl2 ekhruxngmuxthisakhyinkarthaphisixaridaek Thermal cycler hrux PCR machineaehlngkhxmulxun aekikhkhxmmxns miphaphaelasuxekiywkb ptikiriyalukosphxliemxersPCR at Home Amateur Scientist article in the July 2000 issue of Scientific American on performing PCRs with low cost household materials US Patent for PCR Narrated animation and step through animation of PCR From the educational multimedia company Sumanas Adobe Flash required Step through animation of PCR From Cold Spring Harbor s Dolan DNA Learning Center Adobe Flash required ekhathungcak https th wikipedia org w index php title ptikiriyalukosphxliemxers amp oldid 9387564, wikipedia, วิกิ หนังสือ, หนังสือ, ห้องสมุด,
บทความ
, อ่าน, ดาวน์โหลด, ฟรี, ดาวน์โหลดฟรี, mp3, วิดีโอ, mp4, 3gp, jpg, jpeg, gif, png, รูปภาพ, เพลง, เพลง, หนัง, หนังสือ, เกม, เกม
